1. Сврха: Ова процедура има за циљ да обезбеди стандардизовану процедуру за асептичне операције и заштиту стерилних просторија.
2. Област примене: лабораторија за биолошка испитивања
3. Одговорна особа: Супервизор контроле квалитета, тестер
4. Дефиниција: Нема
5. Мере предострожности
Строго спроводите асептичне операције како бисте спречили микробну контаминацију; оператери треба да искључе УВ лампу пре уласка у стерилну просторију.
6. Поступци
6.1. Стерилна просторија треба да буде опремљена стерилном операционом салом и тампон просторијом. Чистоћа стерилне операционе сале треба да достигне класу 10000. Унутрашња температура треба да се одржава на 20-24°C, а влажност ваздуха на 45-60%. Чистоћа чистог стола треба да достигне класу 100.
6.2. Стерилна просторија треба да се одржава чистом и строго је забрањено гомилање отпада ради спречавања контаминације.
6.3. Строго спречити контаминацију све опреме за стерилизацију и подлога за култивацију. Они који су контаминирани треба да престану да их користе.
6.4. Стерилна просторија треба да буде опремљена дезинфекционим средствима радне концентрације, као што су 5% раствор крезола, 70% алкохол, 0,1% раствор хлорметионина итд.
6.5. Стерилну просторију треба редовно стерилисати и чистити одговарајућим дезинфекционим средством како би се осигурало да чистоћа стерилне просторије испуњава захтеве.
6.6. Сви инструменти, инструменти, посуђе и други предмети који се морају унети у стерилну просторију треба да буду чврсто упаковани и стерилисани одговарајућим методама.
6.7. Пре уласка у стерилну просторију, особље мора опрати руке сапуном или дезинфекционим средством, а затим се пресвући у посебну радну одећу, обућу, капе, маске и рукавице у просторији са пуфером (или поново обрисати руке 70% етанолом) пре уласка у стерилну просторију. Операције обављати у бактеријској комори.
6.8. Пре коришћења стерилне просторије, ултраљубичаста лампа у стерилној просторији мора бити укључена за зрачење и стерилизацију дуже од 30 минута, а чиста клупа мора бити укључена за дување ваздуха истовремено. Након завршетка операције, стерилна просторија треба да се благовремено очисти, а затим стерилише ултраљубичастим светлом 20 минута.
6.9. Пре прегледа, спољашње паковање узорка за тестирање треба да остане нетакнуто и не сме се отварати како би се спречила контаминација. Пре прегледа, дезинфикујте спољашњу површину ватама са 70% алкохола.
6.10. Током сваке операције, треба извршити негативну контролу како би се проверила поузданост асептичног рада.
6.11. Приликом упијања бактеријске течности, морате користити усисну лоптицу да бисте је упили. Не додирујте сламку директно устима.
6.12. Игла за инокулацију мора се стерилисати пламеном пре и после сваке употребе. Након хлађења, култура се може инокулирати.
6.13. Сламке, епрувете, петријеве шоље и други прибор који садржи бактеријску течност треба потопити у канту за стерилизацију која садржи 5% раствор Лизола ради дезинфекције, а затим извадити и испрати после 24 сата.
6.14. Ако се бактеријска течност проспе по столу или поду, одмах треба сипати 5% раствор карболне киселине или 3% Лизол на контаминирано подручје најмање 30 минута пре третирања. Када су радна одећа и капе контаминирани бактеријском течношћу, треба их одмах скинути и опрати након стерилизације паром под високим притиском.
6.15. Сви предмети који садрже живе бактерије морају се дезинфиковати пре испирања под славином. Строго је забрањено загађивање канализације.
6.16. Број колонија у стерилној просторији треба проверавати месечно. Са отвореном чистом радном површином, узмите неколико стерилних Петријевих шоља унутрашњег пречника 90 мм и асептично убризгајте око 15 мл хранљивог агар-агара који је отопљен и охлађен на око 45°C. Након очвршћавања, поставите га наопачке на 30 до 35°C. Инкубирајте 48 сати у инкубатору на 30°C. Након доказивања стерилности, узмите 3 до 5 плоча и поставите их лево, средишње и десно од радног положаја. Након отварања поклопца и излагања 30 минута, ставите их наопачке у инкубатор на 30 до 35°C на 48 сати и извадите их. Прегледајте. Просечан број разних бактерија на плочи у чистој просторији класе 100 не сме прећи 1 колонију, а просечан број у чистој просторији класе 10000 не сме прећи 3 колоније. Ако се прекорачи ограничење, стерилну просторију треба темељно дезинфиковати док поновљени прегледи не испуне захтеве.
7. Погледајте поглавље (Метода инспекције стерилности) у „Методе инспекције хигијене лекова“ и „Кинеске стандардне оперативне праксе за инспекцију лекова“.
8. Одељење за дистрибуцију: Одељење за управљање квалитетом
Техничко упутство за чисте собе:
Након што се добије стерилно окружење и стерилни материјали, морамо одржавати стерилно стање како бисмо проучавали одређени познати микроорганизам или користили његове функције. У супротном, различити микроорганизми споља могу лако да се помешају. Феномен мешања небитних микроорганизама споља се у микробиологији назива контаминирајуће бактерије. Спречавање контаминације је критична техника у микробиолошком раду. Потпуна стерилизација с једне стране и спречавање контаминације с друге стране су два аспекта асептичне технике. Поред тога, морамо спречити да микроорганизми који се проучавају, посебно патогени микроорганизми или генетски модификовани микроорганизми који не постоје у природи, побегну из наших експерименталних контејнера у спољашњу средину. За ове сврхе, у микробиологији постоји много мера.
Стерилна просторија је обично мала просторија специјално опремљена у микробиолошкој лабораторији. Може бити изграђена од лимова и стакла. Просторија не би требало да буде превелика, око 4-5 квадратних метара, а висина треба да буде око 2,5 метра. Испред стерилне просторије треба поставити тампон просторију. Врата тампон просторије и врата стерилне просторије не би требало да буду окренута у истом смеру како би се спречило уношење разних бактерија ваздухом. И стерилна просторија и тампон просторија морају бити херметички затворене. Унутрашња вентилациона опрема мора имати уређаје за филтрирање ваздуха. Под и зидови стерилне просторије морају бити глатки, отпорни на задржавање прљавштине и лаки за чишћење. Радна површина треба да буде равна. И стерилна просторија и тампон просторија су опремљене ултраљубичастим светлима. Ултраљубичаста светла у стерилној просторији су удаљена 1 метар од радне површине. Особље које улази у стерилну просторију треба да носи стерилисану одећу и капе.
Тренутно, стерилне просторије углавном постоје у фабрикама микробиологије, док опште лабораторије користе чисте клупе. Главна функција чистих клупа је коришћење ламинарног уређаја за проток ваздуха за уклањање разних ситних прашина, укључујући микроорганизме, са радне површине. Електрични уређај омогућава ваздуху да пролази кроз хепа филтер, а затим улази у радну површину, тако да је радна површина увек под контролом протока стерилног ваздуха. Штавише, постоји ваздушна завеса велике брзине са стране близу спољашње стране како би се спречио улазак спољашњег бактеријског ваздуха.
На местима са тешким условима, уместо чисте клупе могу се користити и дрвене стерилне кутије. Стерилна кутија има једноставну структуру и лако се помера. На предњој страни кутије постоје два отвора која су блокирана вратима на потискивање и повлачење када није у употреби. Можете испружити руке током рада. Горњи део предње стране је опремљен стаклом ради лакшег унутрашњег рада. Унутар кутије се налази ултраљубичаста лампа, а прибор и бактерије се могу убацити кроз мала вратанца са стране.
Асептичне оперативне технике тренутно не само да играју кључну улогу у микробиолошким истраживањима и применама, већ се широко користе и у многим биотехнологијама. На пример, трансгена технологија, технологија моноклонских антитела итд.
Време објаве: 06.03.2024.